绿藻线粒体提取试剂盒

BB-361134
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产品概述 product description

贝博BBproExtra绿藻线粒体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速从各种绿藻提取得到线粒体。
贝博BBproExtra绿藻线粒体提取试剂盒提取的线粒体具有生物活性，可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组分按要求条件保存；2.拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
适用样本
绿藻
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.超声细胞破碎仪
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液
耗材准备
1.超速离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.细胞筛 （40um/70um）
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.以下部分操作步骤针对不同的绿藻样品种类需要根据预实验情况调整操作条件。
使用方法
1.取对数生长中期的绿藻样品，在2000×g离心5分钟，去上清，收集沉淀绿藻。
2.沉淀用 PBS 洗涤一次。
3.在3-5g绿藻细胞沉淀中加入5ml绿藻洗涤液A，充分混匀。
4.室温静置2-3分钟。
5.在2000×g离心10分钟，去上清，收集沉淀绿藻。
6在沉淀中加入10ml绿藻线粒体提取液B，充分混匀。
7.提取液B在300w，超声3s，间隔3s条件超声处理1-15分钟。
8将提取液B用40μm细胞筛过滤。
9.将滤液在800×g离心3分钟，弃沉淀，保留上清。
10.将上清在3000×g离心10分钟，弃沉淀，收集上清。
11.将上清在11000×g离心20分钟，弃上清，收集沉淀。
12.用1ml试剂C重悬沉淀。
13.在11000×g离心20分钟，弃上清，收集沉淀。
14.弃上清，沉淀即为线粒体。
15.用0.5ml线粒体保存液或其他相应的缓冲液重悬线粒体，置冰箱备用或直接用于下游实验。
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