植物细胞核提取试剂盒-非酶法

BB-36112
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的细胞核纯度高。 本试剂盒提取的细胞核保持天然活性，可以用于功能研究等各种下游，也可以用于提取核蛋白。 本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取，冻存样品由于核可能已经损伤破裂，回收率会降低。 本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，而且绝少交叉污染，但是细胞核回收率相比酶法较低。酶法提取制备的植物细胞核，回收率稍有提高，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒（相关产品BB-361122）。请根据实际需要选择试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
植物
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套 4.细胞筛
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的500 mg左右（200 mg-500 mg均可）的新鲜植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入1 ml 提取液A用匀浆机充分匀浆。或者加适量提取液A后用Dounce匀浆器充分匀浆。
3. 在匀浆液中加入1 ml 提取液A，充分混匀，然后将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。
4. 将滤液在1000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
5. 在沉淀中加入500 μl提取液B，充分混匀。
6. 置振荡器振荡15分钟。
7. 在1000×g条件下离心10分钟。弃上清，收集沉淀。
8. 在沉淀中加入200 μl冷的核保存液C，混匀。
9. 即可得到细胞核。
10. 将上述细胞核样品于2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
参考文献
1.Binhui Zhan, et al.
Functional Scanning of Apple Geminivirus Proteins as Symptom Determinants and Suppressors of Posttranscriptional Gene Silencing
Viruses. 2018

2.Hui Dong, et al.
Overexpression of MdCPK1a gene, a calcium dependent protein kinase in apple, increase tobacco cold tolerance via scavenging ROS accumulation
PLoS One 2020

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