白细胞核糖体提取试剂盒

BB-36069
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 白细胞核糖体提取试剂盒适用于白细胞中提取核糖体。提取过程简单方便，可在1小时内完成。 核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle),主要由RNA和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。核糖体无膜结构，主要由蛋白质（40%）和RNA（60%）构成.核糖体按沉降系数分为两类,一类（70S）存在于细菌等原核生物中,另一类（80S）存在于真核细胞的细胞质中。他们有的漂浮在细胞内，有的结集在一起。 需要细菌、植物、叶绿体核糖体提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的产品。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。贝博® BBproExtra® 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
白细胞
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.实验中所有液体以及器具均应该用DEPC处理。用0.1%的DEPC处理12小时然后高压。
4.下游用于蛋白质类实验的话可以不用DEPC处理。
5.细胞最好采用新鲜收集的，或者收集后立即置于-80℃保存的样本。
6.新鲜全血样品按下列步骤操作，已提取的白细胞样品从步骤6开始操作。
使用方法
1. 取1.5ml新鲜抗凝血，静置吸去上层血浆。
2. 加入白细胞提取液1ml，轻轻吹打混匀，冰上静置5分钟。过程中适当偶尔摇动。
3. 在4℃，400-500g离心5分钟，收集底部白细胞沉淀。
4. 重复步骤3和4一次。
5. 在4℃，400-500g离心5分钟，收集底部白细胞沉淀。
6. 在白细胞沉淀中加入500μl-1ml冷的试剂 B，置冰上10分钟。
7. 用Dounce匀浆器匀浆20-30下。
8. 将匀浆液在4℃，1000g力条件下离心5分钟。弃沉淀，收集上清。
9. 将上清在4℃，20000g力条件下离心10分钟，弃沉淀，收集上清。
10. 将上清在4℃，100000g力条件下离心60分钟。弃上清，收集沉淀。
11. 在沉淀中加入400μl冷的试剂C，混匀。
12. 在4℃，100000g力条件下离心60分钟。
13. 弃上清，沉淀用核糖体保存液重悬。
14. 即得到核糖体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

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