产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 植物核糖体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速提取得到植物核糖体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物叶片样本的核糖体,用于冻存样本的提取时核糖体回收率较低。 贝博® BBproExtra® 核糖体提取试剂盒提取的核糖体具有生物活性,可以用于核糖体功能研究、核糖体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用酶法的提取方法,回收率比非酶法稍高,但是耗时较长。需要非酶法提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的试剂盒(相关产品BB-36063),非酶法提取速度较快,可以在一小时内快速提取得到核糖体,但是回收率比酶法核糖体提取试剂盒稍低。请根据不同的需要选择试剂盒。 本试剂盒提取得到的为真核型的核糖体,需要叶绿体线粒体等原核型核糖体提取的请选择贝博其它货号的试剂盒(相关产品BB-36065)。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
提取液2-8℃保存;
长期不用-20℃保存。
长期不用-20℃保存。
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
植物
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 取200 mg-500 mg新鲜植物样本叶片,洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入500 μl试剂A,充分混匀。
3. 在30℃条件下静置15分钟。
4. 在2000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
5. 在沉淀中加入0.5 ml提取液B,充分混匀。
6. 将提取液B样本悬液置振荡器37℃-45℃或室温振荡24-72小时。。
7. 在2000×g离心5分钟,弃上清,收集沉淀。
8. 在沉淀中加入500 μl试剂C重悬沉淀,充分混匀。
9. 用匀浆器/匀浆机充分匀浆。
10. 将匀浆液置4℃振荡20-30分钟。
11. 将匀浆液在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
12. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
13. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
14. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
15. 弃上清,沉淀即为核糖体。
16. 用相应的缓冲液重悬核糖体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
2. 加入500 μl试剂A,充分混匀。
3. 在30℃条件下静置15分钟。
4. 在2000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
5. 在沉淀中加入0.5 ml提取液B,充分混匀。
6. 将提取液B样本悬液置振荡器37℃-45℃或室温振荡24-72小时。。
7. 在2000×g离心5分钟,弃上清,收集沉淀。
8. 在沉淀中加入500 μl试剂C重悬沉淀,充分混匀。
9. 用匀浆器/匀浆机充分匀浆。
10. 将匀浆液置4℃振荡20-30分钟。
11. 将匀浆液在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
12. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
13. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
14. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
15. 弃上清,沉淀即为核糖体。
16. 用相应的缓冲液重悬核糖体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
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