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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 核糖体提取试剂盒（低速离心法）只需要达到20000×g以内的离心力即可提取核糖体，一般的常规台式离心机均可以满足使用要求。 贝博® BBproExtra® 核糖体提取试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的核糖体的提取。 用于提需要细菌、植物、叶绿体核糖体提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的产品。 传统的核糖体提取方法需要采用较高的离心力或者采用密度梯度离心，对实验室离心机设备要求较高，对实验的操作细致程度要求较高。如果实验室没有能达到100000×g以上的离心力的设备，则没法进行提取。 本试剂盒提取的核糖体可以用于各种核糖体功能研究、蛋白提取等下游应用。 贝博® BBproExtra® 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
动物细胞/组织
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.最好使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，也可用普通玻璃匀浆器匀浆，但是核糖体蛋白回收率会下降。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.最好使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，也可用普通玻璃匀浆器匀浆，但是核糖体蛋白回收率会下降。
使用方法
细胞核糖体提取：
1. 取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；
2. 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 加入500 μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器匀浆充分匀浆，然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
6. 将上清在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
8. 将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
9. 在上清中加入125 μl试剂B，充分混匀。
10. 置2-8℃冰箱静置过夜。
11. 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
12. 小心移除上清，收集沉淀。
13. 沉淀即为核糖体。
组织核糖体蛋白提取：
1. 取50-100 mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。
2. 用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3. 加入500 μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器充分匀浆30-40下，至无明显固体团块。然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
6. 在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
8. 将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
9. 在上清中加入125 μl试剂B，充分混匀。
10. 置2-8℃冰箱静置过夜。
11. 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
12. 小心移除上清，收集沉淀。
13. 沉淀即为核糖体。
1. 取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；
2. 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 加入500 μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器匀浆充分匀浆，然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
6. 将上清在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
8. 将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
9. 在上清中加入125 μl试剂B，充分混匀。
10. 置2-8℃冰箱静置过夜。
11. 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
12. 小心移除上清，收集沉淀。
13. 沉淀即为核糖体。
组织核糖体蛋白提取：
1. 取50-100 mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。
2. 用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3. 加入500 μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器充分匀浆30-40下，至无明显固体团块。然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
6. 在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
8. 将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
9. 在上清中加入125 μl试剂B，充分混匀。
10. 置2-8℃冰箱静置过夜。
11. 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
12. 小心移除上清，收集沉淀。
13. 沉淀即为核糖体。
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