真菌内质网提取试剂盒(低速离心法)-小型真菌

BB-360542
选择规格
  • 50T
  • 100T
价格
  • ¥1000元
  • ¥1600元
数量
产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 真菌内质网提取试剂盒(低速离心法)提供全套试剂,适用于从各种丝状真菌、蕈菌等真菌样本中提取内质网。提取过程简单方便。 传统的内质网提取方法需要采用较高的离心力或者采用密度梯度离心,对实验室离心机设备要求较高,对实验的操作细致程度要求较高。如果实验室没有能达到50000×g以上的离心力的设备,则没法进行提取。 贝博® BBproExtra® 真菌内质网提取试剂盒(低速离心法)只需要达到20000×g以内的离心力即可提取内质网,一般的常规台式离心机均可以满足使用要求。 本试剂盒采用聚合法提取,提取过程简单方便,但是内质网纯度相比高速离心法较低。如果下游实验对内质网纯度要求不高,可以选择低速离心法提取试剂盒,对提取纯度要求较高的话,可以选择高速离心法的提取试剂盒(相关产品BB-36054)。请根据实际需要选择试剂盒。 内质网存在于除哺乳动物成熟的红细胞外的各种真核细胞中。内质网为由生物膜构成的互相通连的片层隙状或小管状系统,膜片间的隙状空间称为池,通常与细胞外隙和细胞浆基质之间不直接相通。这种细胞内的膜性管道系统一方面构成细胞内物质运输的通路,另方面为细胞内各种各样的酶反应提供广阔的反应面积。内质网的功能与蛋白质的合成、糖类和脂类的合成、解毒、同化作用有关,并且还具有运输蛋白质的功能。 贝博® BBproExtra® 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
真菌
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机2.振荡器3.Dounce匀浆器4.涡旋混匀器5.移液器6.冰箱7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管2.吸头3.一次性手套4.100 μm细胞筛
使用注意事项
 预实验很重要。必须要做预实验,在正式实验之前取少量样本优化实验条件,并像正式样本一样认真进行,看实验结果是否可行,实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性,不同样本的实验条件通常差异较大,同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同,为了避免浪费正式样本和试剂,一定要提前预实验优化实验条件。 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 取新鲜真菌样本用手术剪刀尽可能剪碎。 2. 加入1-2 ml 提取液A用匀浆机/匀浆器充分匀浆。3. 将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。4. 将滤液在200×g条件下离心3分钟,弃沉淀,收集上清。5. 将上清在500×g离心5分钟。弃沉淀,收集上清。6. 将上清在1000×g条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。7. 将上清在3000×g离心10分钟。弃沉淀,收集上清。8. 将上清11000×g离心20分钟。弃沉淀,收集上清。9. 将上清在4℃,12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。10. 在上清中加入1/4试剂A体积的试剂B,充分混匀。11. 置2-8℃冰箱静置过夜。【注】: 静置保存时间不少于10小时。12. 在4℃条件下,10000×g离心20-45分钟。13. 小心移除上清,收集沉淀。14. 沉淀即为内质网。15. 用合适的缓冲液重悬内质网,置冰箱备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
 内质网蛋白浓度低?真菌内质网蛋白丰度比较低,在条件允许的情况下,尽可能增加样本量。处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂A的匀浆次数,并适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。 提取的内质网具有活性吗?本试剂盒提取的内质网均保持其天然结构和活性。

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