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高尔基体（Golgi apparatus, Golgi bodies）是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体；高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称为形成面（forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面（mature face）或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡，在具有极性的细胞中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。因其看上极像滑面内质网，因此有科学家认为它是由滑面内质网进化而来的。 高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。 贝博® BBproExtra® 试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的高尔基体提取。 本试剂盒可以用于冻存样本的提取。 试剂盒提取得到的高尔基体具有完整生物活性，可以用于高尔基体功能研究、蛋白提取等各种下游应用。 除了高尔基体提取试剂盒，贝博还有细胞核提取、线粒体提取等各种亚细胞结构的提取试剂盒以及相关的蛋白质提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.吸头
3.一次性手套
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.最好使用标准Dounce匀浆器匀浆，如果没有标准Dounce匀浆器，用普通1ml玻璃匀浆器匀浆也可，但是线粒体回收率会下降。
1. 取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 加入500 μl冷的试剂 A重悬细胞，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器充分匀浆几分钟。
5. 将匀浆液在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
7. 将上清在4℃，3000×g力条件下离心10分钟。
8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
9. 将上清在4℃，5000×g力条件下离心10分钟。
10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
11. 在上清中加入10 μl试剂WT。
12. 在4℃，20000×g力条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
13. 在沉淀中加入500 μl冷的试剂B，轻轻混匀。
14. 在4℃，20000×g力条件下离心30分钟。
15. 弃上清，沉淀用高尔基体保存液重悬。
16. 即得到高尔基体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
组织高尔基体提取：
1. 取50 mg -100 mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。
2. 用手术剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3. 加入500 μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。
4. 用Dounce匀浆器充分匀浆几分钟。
5. 将匀浆液在4℃，1000g力条件下离心5分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
7. 将上清在4℃，3000×g力条件下离心10分钟。
8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
9. 将上清在4℃，5000×g力条件下离心10分钟。
10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
11. 在上清中加入10 μl试剂WT。
12. 在4℃，20000×g力条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
13. 在沉淀中加入500 μl冷的试剂B，轻轻混匀。
14. 在4℃，20000×g力条件下离心30分钟。
15. 弃上清，沉淀用高尔基体保存液重悬。
16. 即得到高尔基体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
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