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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统，维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆，而几乎没有交叉污染。 本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能，适合下游分析如转录活性，RNA拼接，gel－shift分析，报告分析，酶活性分析和WB等。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
动物细胞
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法
1. 取5-10×106个细胞，在4℃，500×g条件下离心3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞沉淀中加入400 μl冷的提取液 A，涡旋振荡混匀或吹打混匀，置冰上振荡20-30分钟。
4. 在4℃，1200×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞浆组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
6. 沉淀用PBS重悬，然后在4℃，2000×g条件下离心5分钟，弃上清。
7. 沉淀为细胞核组分，将沉淀用200 μl保存液B重悬后保存备用或直接用于下游实验。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞沉淀中加入400 μl冷的提取液 A，涡旋振荡混匀或吹打混匀，置冰上振荡20-30分钟。
4. 在4℃，1200×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞浆组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
6. 沉淀用PBS重悬，然后在4℃，2000×g条件下离心5分钟，弃上清。
7. 沉淀为细胞核组分，将沉淀用200 μl保存液B重悬后保存备用或直接用于下游实验。
参考文献
1.Xiao-Yu Cheng, Jun-Da Liu, Xin-Yi Lu, et al.
miR-203 Inhibits Alcohol-Induced Hepatic Steatosis by Targeting Lipin1
Frontiers in Pharmacology 2018
2.Hong Yu Bo Yuan Qiubo Chu, et al.
Protective roles of isoastilbin against Alzheimer's disease via Nrf2‑mediated antioxidation and anti‑apoptosis
International Journal of Molecular Medicine 2019
3.Chuanshang Cheng et al.
Oregano Essential Oil Attenuates RAW264.7 Cells from Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Response through Regulating NADPH Oxidase Activation-Driven Oxidative Stress
Molecules 2018
4.Yi Zou, Jun Wang, et al.
Oregano Essential Oil Induces SOD1 and GSH Expression through Nrf2 Activation and Alleviates Hydrogen Peroxide-Induced Oxidative Damage in IPEC-J2 Cells
Oxidative Medicine and Cellular Longevity 2016
miR-203 Inhibits Alcohol-Induced Hepatic Steatosis by Targeting Lipin1
Frontiers in Pharmacology 2018
2.Hong Yu Bo Yuan Qiubo Chu, et al.
Protective roles of isoastilbin against Alzheimer's disease via Nrf2‑mediated antioxidation and anti‑apoptosis
International Journal of Molecular Medicine 2019
3.Chuanshang Cheng et al.
Oregano Essential Oil Attenuates RAW264.7 Cells from Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Response through Regulating NADPH Oxidase Activation-Driven Oxidative Stress
Molecules 2018
4.Yi Zou, Jun Wang, et al.
Oregano Essential Oil Induces SOD1 and GSH Expression through Nrf2 Activation and Alleviates Hydrogen Peroxide-Induced Oxidative Damage in IPEC-J2 Cells
Oxidative Medicine and Cellular Longevity 2016
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