产品概述
product description
保存温度
2-8℃
注意事项
蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
有效期
一年
检测方法
WB、IP等
适用样本
动物细胞/组织
产品特点
1.使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2.提取过程简单方便,将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5.总蛋白提取液含多种有效成分,可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可结
合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包
含6种独立的蛋白酶抑制剂 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、
E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成
使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、
天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等
产品应用
WB、IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
PBS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
使用方法
A. 细胞蛋白提取
1. 蛋白提取液制备:
每1ml冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的蛋白提取液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃,12000-14000g条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B. 组织蛋白提取
1. 蛋白提取液制备:
每1ml冷的蛋白提取液加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎,加入1ml蛋白提取液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆在4℃振荡15-25分钟。
4. 在4℃,12000g条件下离心10分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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