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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物，Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被复合物蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色，在一定的条件下，蓝色深度与蛋白的量成正比，可根据750nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。 在1～1500μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白标准品注意防止微生物污染。避免反复冻融。
2.可以根据需要将蛋白标准分装后冻存。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
2.可以根据需要将蛋白标准分装后冻存。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
酶标仪或分光光度计
适用样本
蛋白样本
产品应用
蛋白定量
仪器准备
1.酶标仪或分光光度计
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒
试剂准备
1.纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.96孔板
使用注意事项
1.在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使溶解, 如发现细菌污染则应丢弃。
2.许多干扰物质会降低颜色反应。
3.使用孵育时，应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
2.许多干扰物质会降低颜色反应。
3.使用孵育时，应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
使用方法
96孔酶标板测定：
1. 定量工作液配制：
根据样品数量，按50体积试剂A加1体积试剂B（50:1）配制适量定量工作液，充分混匀。
2. 蛋白标准工作液配制：
将蛋白标准储存液用双蒸水5倍稀释，配成1mg/ml的工作液。
3. 标准曲线绘制。取一块酶标板，按以下表格数据加入试剂：
4. 加入Folin-Ciocalteu试剂振荡混匀后，室温放置30分钟。
5. 用酶标仪测定A750，以不含BSA的光吸收值为空白对照。
6. 以蛋白含量（g）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
7. 样品测定：将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度，取20l样品，加入200l 定量工作液，混匀后室温放置10分钟，然后加入20 μl Folin-Ciocalteu试剂，混匀后室温放置30分钟。
8. 以0号孔为对照，测定样品吸收值A750。
9. 根据测得的吸收值，在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
10. 计算蛋白浓度：以查得的蛋白含量乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
比色皿测定
按照比色皿规格，与以上方法相同，按比例增加各溶液体积即可。
1. 定量工作液配制：
根据样品数量，按50体积试剂A加1体积试剂B（50:1）配制适量定量工作液，充分混匀。
2. 蛋白标准工作液配制：
将蛋白标准储存液用双蒸水5倍稀释，配成1mg/ml的工作液。
3. 标准曲线绘制。取一块酶标板，按以下表格数据加入试剂：
4. 加入Folin-Ciocalteu试剂振荡混匀后，室温放置30分钟。
5. 用酶标仪测定A750，以不含BSA的光吸收值为空白对照。
6. 以蛋白含量（g）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
7. 样品测定：将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度，取20l样品，加入200l 定量工作液，混匀后室温放置10分钟，然后加入20 μl Folin-Ciocalteu试剂，混匀后室温放置30分钟。
8. 以0号孔为对照，测定样品吸收值A750。
9. 根据测得的吸收值，在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
10. 计算蛋白浓度：以查得的蛋白含量乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
比色皿测定
按照比色皿规格，与以上方法相同，按比例增加各溶液体积即可。
参考文献
1.Jian Wang , et al.
Evaluation of Insulin-mediated Regulation of AKT Signaling in Childhood Acute Lymphoblastic Leukemia
Journal of Pediatric Hematology Oncology 2019
Evaluation of Insulin-mediated Regulation of AKT Signaling in Childhood Acute Lymphoblastic Leukemia
Journal of Pediatric Hematology Oncology 2019
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