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产品概述
product description
贝博TM BBproExtra® 酵母蛋白裂解液是一种高效方便的酵母裂解液。能裂解各种酵母细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。 提取过程简单方便，避免了重复性差的研磨法，超声波法或压榨法对酵母细胞的破坏，避免激烈的机械处理造成的氧化和热度升高对目的蛋白的破坏作用。 贝博TM可以提供针对各种不同下游应用的蛋白裂解液。 贝博TM可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒，专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。贝博TM还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.裂解液A避免反复冻融。
2.蛋白酶抑制剂从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.裂解液A避免反复冻融。
有效期
1年
检测方法
WB、IP等
适用样本
酵母
产品特点
1.使用方便，提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2.提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5.总蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
2.提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5.总蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
WB、IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量试剂盒
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
离心管
吸头
一次性手套
吸头
一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5.本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含EDTA，根据需要可自行加入。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5.本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含EDTA，根据需要可自行加入。
使用方法
1. 提取液制备：
每500ul酵母蛋白提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取酵母培养物，在4℃，1000g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用冷PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 用PBS重悬酵母，加入终浓度0.2%的β- 巯基乙醇，充分混匀，室温静置20分钟。
5. 在1000g离心5分钟，弃上清，留沉淀。
6. 每100-200ul体积酵母沉淀物中加入500ul冷的酵母蛋白提取液A，充分混匀。
7. 在室温或37℃条件下于振荡30分钟-2小时。
8. 在4℃，2000g条件下离心5-10分钟，弃上清，留沉淀。
9. 在沉淀物中加入300-500ul冷的酵母蛋白提取液B，混匀后，在2-8℃条件下振荡30-45分钟。
10. 在4℃，14000g条件下离心15分钟。
11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母总蛋白。
12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
每500ul酵母蛋白提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取酵母培养物，在4℃，1000g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用冷PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 用PBS重悬酵母，加入终浓度0.2%的β- 巯基乙醇，充分混匀，室温静置20分钟。
5. 在1000g离心5分钟，弃上清，留沉淀。
6. 每100-200ul体积酵母沉淀物中加入500ul冷的酵母蛋白提取液A，充分混匀。
7. 在室温或37℃条件下于振荡30分钟-2小时。
8. 在4℃，2000g条件下离心5-10分钟，弃上清，留沉淀。
9. 在沉淀物中加入300-500ul冷的酵母蛋白提取液B，混匀后，在2-8℃条件下振荡30-45分钟。
10. 在4℃，14000g条件下离心15分钟。
11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母总蛋白。
12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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