植物质膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

BB-3184
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产品概述 product description

跨膜蛋白承担各种生物功能，扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。 贝博植物质膜蛋白提取试剂盒（二维电泳用）是一种基于化学而非去污剂方法的高产质膜蛋白提取试剂盒。针对性的提取植物组织质膜蛋白，有效的避免细胞内其它细胞器膜和核膜的污染。植物质膜蛋白提取试剂盒可以从各种植物中提取质膜蛋白，可用于纯化质膜蛋白的粗品制备及质膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系贝博，选用其它产品号的产品。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
双向电泳
适用样本
植物
产品特点
1、 使用方便。
2、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
双向电泳
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项：
 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法
1、 每500ul质膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2、 取200mg植物组织样本剪碎，置于研钵中用液氮研磨。（没有液氮也可直接置冰上研磨即可）
3、 研磨后加入500ul提取液，混匀后于一个预冷的干净离心管中在冰上静置2-3小时。
4、 将提取液在2-8℃条件下12000×g离心5分钟，取上清。
5、 在上清中加入5ul抽提液B，充分混匀。
6、 在37℃水浴10分钟。
7、 在37℃ 1000×g离心5分钟。
8、 此时液体分为2层，移除上层部分，小心吸取下层管底部大约50ul液体。
9、 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验或用试剂C稀释后，进行下游实验。

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