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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 细菌胞外多糖（extracellularpolysaccharides，EPSs）提取试剂盒主要用于提取细菌荚膜多糖以及细胞外的黏液多糖等自然或病理条件下细菌表面包被的多糖物质。 包被于菌株表面的胞外多糖对细菌的粘附以及在竞争环境中的存活和生长都具有重要的作用。研究发现多种细菌的胞外多糖具有很强的生物学活性。 本试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌胞外多糖，提取产量高，省时，蛋白质和核酸污染低。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
细菌
产品特点
1.适用性广，能从所有细菌提取胞外多糖。
2.操作时间短，将胞外多糖提取的时间缩短至1-2小时。
3.操作简单方便。
4.提取的多糖下游应用广。
2.操作时间短，将胞外多糖提取的时间缩短至1-2小时。
3.操作简单方便。
4.提取的多糖下游应用广。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项：
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
使用方法
1. 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞
2. 加入500 μl试剂A重悬细菌，8000×g离心3分钟，弃上清。
3. 收集沉淀，加入500 μl试剂A重悬沉淀，8000×g离心3分钟，弃上清。
4. 收集沉淀，加入500 μl提取液B重悬沉淀。
5. 在150-300 w超声10秒间隔10秒，超声5分钟。
6. 在10000×g离心10分钟取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C，剧烈涡旋20秒充分混匀。
8. 在66-68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
9. 置4℃静置过夜。
10. 在4℃，3000×g离心20分钟。
11. 取最上层上清至另一干净离心管，即得胞外多糖样品。
参考文献
1.W. Lin, et al.
Effects of glutaraldehyde–didecyldimethylammonium bromide combined disinfectant on the cell surface of Staphylococcus aureus
Journal of Applied Microbiology 2018
2.Quanju Xiang, et al.
Effect of common bean seed exudates on growth, lipopolysaccharide production, and lipopolysaccharide transport gene expression of Rhizobium anhuiense
Canadian Journal of Microbiology 2019
3.Bin Ma, et al.
Haemophilus parasuis infection activates NOD1/2-RIP2 signaling pathway in PK-15 cells
Developmental & Comparative Immunology 2018
Effects of glutaraldehyde–didecyldimethylammonium bromide combined disinfectant on the cell surface of Staphylococcus aureus
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2.Quanju Xiang, et al.
Effect of common bean seed exudates on growth, lipopolysaccharide production, and lipopolysaccharide transport gene expression of Rhizobium anhuiense
Canadian Journal of Microbiology 2019
3.Bin Ma, et al.
Haemophilus parasuis infection activates NOD1/2-RIP2 signaling pathway in PK-15 cells
Developmental & Comparative Immunology 2018
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