产品概述
product description
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性极高(在250℃下干热灭菌2h才完全灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。 由于LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。 贝博® BBproExtra® LPS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖,提取产量高,省时,蛋白质和核酸污染低。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2. 试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
细菌
产品特点
1.适用性广,能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。
2.操作简单方便。
3.提取LPS下游应用广,包括直接用于免疫刺激
2.操作简单方便。
3.提取LPS下游应用广,包括直接用于免疫刺激
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项:
1.离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。 2.可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。 2.可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。
使用方法
1. 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞
2. 加入500 μl试剂A重悬细菌,8000×g离心3分钟,弃上清。
3. 收集沉淀,加入500 μl试剂A重悬沉淀,8000×g离心3分钟,弃上清。
4. 收集沉淀,加入500 μl提取液B重悬沉淀。
5. 在150-300w超声10秒间隔10秒,超声5-15分钟。
6. 在10000×g离心10分钟取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C,剧烈涡旋20秒充分混匀。
8. 在66-68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
9. 置4℃静置过夜。
10. 在4℃,3000×g离心20分钟。
11. 取最上层上清至另一干净离心管,即得脂多糖样品。
参考文献
1.W. Lin, et al.
Effects of glutaraldehyde–didecyldimethylammonium bromide combined disinfectant on the cell surface of Staphylococcus aureus
Journal of Applied Microbiology 2018 (IF=7.083)
2.Quanju Xiang, et al.
Effect of common bean seed exudates on growth, lipopolysaccharide production, and lipopolysaccharide transport gene expression of Rhizobium anhuiense
Canadian Journal of Microbiology 2019
3.Bin Ma, et al.
Haemophilus parasuis infection activates NOD1/2-RIP2 signaling pathway in PK-15 cells
Developmental & Comparative Immunology 2018
Effects of glutaraldehyde–didecyldimethylammonium bromide combined disinfectant on the cell surface of Staphylococcus aureus
Journal of Applied Microbiology 2018 (IF=7.083)
2.Quanju Xiang, et al.
Effect of common bean seed exudates on growth, lipopolysaccharide production, and lipopolysaccharide transport gene expression of Rhizobium anhuiense
Canadian Journal of Microbiology 2019
3.Bin Ma, et al.
Haemophilus parasuis infection activates NOD1/2-RIP2 signaling pathway in PK-15 cells
Developmental & Comparative Immunology 2018
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