bestbio@163.com
服务热线：021-33921235
登录
说明书下载
产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 植物种子储藏蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物种子样品中提取球蛋白、清蛋白等。提取过程简单方便。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用贝博其他货号的试剂盒（相关产品BB-31832）。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理（相关产品BB-38113）。
本试剂盒不适用于谷蛋白、醇溶蛋白含量高的样本。需要提取谷蛋白、醇溶蛋白请使用贝博其他货号的试剂盒（相关产品BB-312472/312473）。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 试剂拆封后请尽快使用完！
2. 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
3. 试剂拆封后请尽快使用完！
2. 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
3. 试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等
适用样本
植物种子
仪器准备
1. 离心机
2. 振荡器
3. 研钵
4. 涡旋混匀器
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒
2. 振荡器
3. 研钵
4. 涡旋混匀器
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液
2. 蛋白定量试剂盒3. 液氮
2. 蛋白定量试剂盒3. 液氮
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理
使用方法
1. 将适量待提取种子样本（剥皮），用PBS或纯水洗涤3次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入1 ml蛋白提取液A充分混匀，移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-120分钟。
5. 在4℃，15000×g离心20分钟。
6. 收集上清，弃沉淀。
7. 在900 μl上清液体样本中加入100 μl试剂B，充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃，留沉淀。
11. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
12. 加入200 μl试剂C到离心管中。
13. 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。弃上清，留沉淀。
14. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
15. 用40 μl - 100 μl试剂D溶解蛋白沉淀，充分混匀。
16. 在4℃，10000×g条件下离心10分钟。
17. 收集上清用于下游实验。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入1 ml蛋白提取液A充分混匀，移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-120分钟。
5. 在4℃，15000×g离心20分钟。
6. 收集上清，弃沉淀。
7. 在900 μl上清液体样本中加入100 μl试剂B，充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃，留沉淀。
11. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
12. 加入200 μl试剂C到离心管中。
13. 在4℃，15000×g以上条件下离心15分钟。弃上清，留沉淀。
14. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
15. 用40 μl - 100 μl试剂D溶解蛋白沉淀，充分混匀。
16. 在4℃，10000×g条件下离心10分钟。
17. 收集上清用于下游实验。
常见问题分析
1. 蛋白浓度低？
部分植物种子球蛋白丰度极低，在条件允许的情况下，需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2. 用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂E中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。
部分植物种子球蛋白丰度极低，在条件允许的情况下，需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2. 用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂E中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。
参考文献
1. Xiaokang Li et al.
Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
Carbon 2018 （IF 11.307）
2. Na Zhao et al.
MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
Journal of Experimental Botany 2016 （IF 7.298）
Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
Carbon 2018 （IF 11.307）
2. Na Zhao et al.
MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
Journal of Experimental Botany 2016 （IF 7.298）
-
优惠促销Promotion
-
轻松下单Order
-
在线留言Online message
-
帮助中心Help center