精子组蛋白提取试剂盒

BB-31175
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 组蛋白提取试剂盒提供了一种简单而应用广泛的方法以及相应的试剂提取组蛋白。适用于从各种动物精液样品中提取组蛋白。提取过程简单方便。 组蛋白提取产物的产量大约0.4 mg 每107 个细胞或100 mg 湿重沉淀，不同的样本中产量差异很大。 提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。 贝博® BBproExtra® 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。 2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。 3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
精子
产品特点
1.使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。 2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机2.振荡器3.匀浆机/匀浆器4.涡旋混匀器5.移液器6.冰箱7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.蛋白定量
耗材准备
1.离心管2.吸头3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。 2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。 4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 5.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）
使用方法
1. 提取液制备：每500 μl蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。【注】： 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。 以下步骤中使用的蛋白提取液为此步配制好的含蛋白酶抑制剂的提取液。2. 取0.5 ml-1 ml新鲜精液，在室温或37℃静置30-60分钟。3. 在完全液化的精液中加入0.5 ml提取液E，充分混匀。4. 在4℃，3000×g条件下离心15分钟，小心吸取上清，尽可能吸干，留沉淀。5. 在沉淀中加入500 μl蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下轻轻振荡10分钟。【注】： 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。 没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。6. 在4℃，16000×g条件下离心15分钟，弃上清。7. 沉淀中加入100 μl组蛋白提取液B。8. 用200 μl枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀。9. 置4℃冰箱过夜存放。10. 16000×g条件下离心10分钟，收集上清。11. 在上清中加入10-25 μl 试剂C充分混匀。12. 加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。【注】： 加入上样缓冲液液后应为上样缓冲液的蓝色，如果颜色变黄，可以再加入试剂C混匀，每次加入5 μl，至恢复蓝色为止。
参考文献
1.GuangFen Zhang et al. Histone deacetylase 3 in hippocampus contributes to memory impairment after chronic constriction injury of sciatic nerve in micePain 2021  2.Fan Wei et al. Molecular cloning and subcellular localization of six HDACs and their roles in response to salt and drought stress in kenaf (Hibiscus cannabinus L.)Biological Research 2019

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